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選購共聚焦顯微鏡要考慮這2個因素

更新時間:2021-07-26      點擊次數(shù):917
  共聚焦顯微鏡比寬場顯微鏡具有更多的優(yōu)勢,共聚焦顯微鏡可以對樣品做連續(xù)光學切片并排除非焦平面的信號干擾,為此共聚焦顯微鏡的應用也的確更為普遍。不過市面上各種各樣的共聚焦顯微鏡越來越多,要如何進行選擇呢?在選擇共聚焦顯微鏡時,基本也重要的考慮因素主要有兩點:您想要研究的樣本類型(如:固定的細胞還是活細胞),以及您想要進行的檢測類型(如:靜態(tài)還是動態(tài)細胞過程)。
  一、固定細胞的共聚焦成像
  要對固定且染色了的細胞或組織成像,我們一般選擇激光掃描共聚焦(LSCM)。這主要是因為固定的死細胞缺乏活細胞中的快速生物學事件,能更好的受益于LSCM較高的空間分辨率。LSCM成像是通過激光對樣品進行光學層切,掃描速度(取決于掃描陣鏡速度)一般為1fps。曝光時間越長意味著光漂白的風險越大,但對于固定的死細胞,時間并不是很關鍵,我們可以通過拍多張圖片來平均。
  二、活細胞的共聚焦成像
  成像活細胞需要額外的保護,以免不友好環(huán)境的干擾。在成像時,我們首先需要考慮的是保持細胞的活性和健康,恒溫加熱元件和灌流系統(tǒng)是的,尤其對于進行time-lapse(時間序列)的研究來說??刂苹罴毎頎顟B(tài)的快速生化事件是大多數(shù)人想要研究的,但這些事件對于傳統(tǒng)LSCM來說太快了。此外,LSCM的長時間曝光還會引發(fā)毒性光照損傷細胞。因此,對活細胞進行成像會需要特殊的共聚焦顯微鏡。
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