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熒光顯微鏡是對熒光細胞進行定性和定量研究的工具之一

更新時間:2021-12-28      點擊次數(shù):980
  熒光顯微鏡是免疫熒光細胞化學(xué)的基本工具。是由光源、濾板系統(tǒng)和光學(xué)系統(tǒng)等主要部件組成。熒光顯微鏡利用一定波長的光激發(fā)標本發(fā)射熒光,通過物鏡和目鏡系統(tǒng)放大以觀察標本的熒光圖像。細胞中有些物質(zhì),如葉綠素等,受紫外線照射后可發(fā)熒光;另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光,但如果用熒光染料或熒光抗體染色后,經(jīng)紫外線照射亦可發(fā)熒光,熒光顯微鏡就是對這類物質(zhì)進行定性和定量研究的工具之一。
  熒光顯微鏡使用注意事項:
  1、嚴格按照熒光顯微鏡說明書要求進行操作,不要隨意改變程序。
  2、熒光顯微鏡應(yīng)在暗室中進行檢查。進入暗室后,接上電源,點燃超高壓汞燈5~15min,待光源發(fā)出強光穩(wěn)定后,眼睛*適應(yīng)暗室,再開始觀察標本。
  3、防止紫外線對眼睛的損害,在調(diào)整光源時應(yīng)戴上防護眼鏡。
  4、檢查時間每次以1~2h為宜,超過90min,超高壓汞燈發(fā)光強度逐漸下降,熒光減弱;標本受紫外線照射3~5min后,熒光也明顯減弱;所以,Z多不得超過2~3h。
  5、熒光顯微鏡光源壽命有限,標本應(yīng)集中檢查,以節(jié)省時間,保護光源。天熱時,應(yīng)加電扇散熱降溫,新?lián)Q燈泡應(yīng)從開始就記錄使用時間。燈熄滅后欲再用時,須待燈泡充分冷卻后才能點燃。一天中應(yīng)避免數(shù)次點燃光源。
  6、標本染色后立即觀察,因時間久了熒光會逐漸減弱。若將標本放在聚乙烯塑料袋中保存,可延緩熒光減弱時間,防止封裱劑蒸發(fā)。
  7、熒光亮度的判斷標準:一般分為四級,即“-”表示無或可見微弱熒光。“+”表示僅能見明確可見的熒光。“++”表示可見有明亮的熒光。“+++”表示可見耀眼的熒光。
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