合理使用徠卡激光共聚焦顯微鏡
更新時間:2022-03-09 點擊次數(shù):535
徠卡激光共聚焦顯微鏡是近代生物醫(yī)學圖象儀器的重要發(fā)展之一,它是在成象的基礎上加裝激光掃描裝置,使用紫外光或可見光激發(fā)熒光探針,利用計算機進行圖象處理,從而得到細胞或組織內部微細結構的熒光圖象,以及在亞細胞水平上觀察生理信號及細胞形態(tài)的變化。主要用于組織切片、活細胞的熒光標記、三維圖像重建分析研究;細胞生物物質、離子的定性、定量、定時和定位分布檢測等,可以在同一張樣品上同時進行多重熒光標記觀察。對活細胞或組織切片進行連續(xù)掃描,可獲得精細的細胞骨架、染色體、細胞器和細胞膜系統(tǒng)的三維圖像。與普通熒光顯微鏡相比,具有更高對比度、解析度和高靈敏度。
在使用過程中如果使用和維護不當,常會出現(xiàn)一些問題,或者不能達到儀器的應有的效果。所有這些情況,有的是由于使用不當所致,有的是由于維護不善,長年失修引起的。因此對徠卡激光共聚焦顯微鏡的合理使用和妥善維護是非常重要的:
1、在使用時,要根據(jù)使用要求選用適當?shù)姆糯蟊稊?shù)。
2、將各倍率的物鏡濃順序裝在轉換器上,在物鏡安裝前一定要將物鏡的螺紋和接觸端面以及轉換器的螺孔和接觸面部力構應清潔處理,不允許有任何灰塵存在,否則,會造成安裝不對而影響光學系統(tǒng)和成象質量。
3、按所要觀察的標本切片放置在工作臺面上,并用壓片將標本切片壓緊,如有移動尺的顯微a,可用卡腳將標本切片卡平穩(wěn),不然當移動只作縱向或橫向移動時,觀察的象團不穩(wěn)定,當然這也有可6曙由于移動尺本身質量不好所致。如有象質不穩(wěn)定時,則可作適量的微調即能彌補這個缺點。如果發(fā)現(xiàn)微調值太大時,這說明移動尺作縱向或橫向移動的軌跡線不平行于工作臺面,或可能是工作臺面的不平皮。在這種情況下,應將顯微鏡送檢修單位進行修理。
4、在觀察標本切片時,必然要進行調焦,首先是祖調,而后是微調。在根調時應根據(jù)不同倍率物鏡的工作距離作粗購的調節(jié),接著用眼觀察目鏡作粗調,直至能看到標本的輪廓后再進行微調。
5、在觀察標本切片時,需要有一定的照明,其照明的光源有自然光源和人工光源兩種,不管用那種光源,為使在觀察時能得到清晰的物象,共亮度要合
適。