共聚焦顯微鏡比寬場(chǎng)顯微鏡具有更多的優(yōu)勢(shì)，共聚焦顯微鏡可以對(duì)樣品做連續(xù)光學(xué)切片并排除非焦平面的信號(hào)干擾，為此共聚焦顯微鏡的應(yīng)用也的確更為普遍。不過(guò)市面上各種各樣的共聚焦顯微鏡越來(lái)越多，要如何進(jìn)行選擇呢？

　　共聚焦顯微鏡比寬場(chǎng)顯微鏡具有更多的優(yōu)勢(shì)，共聚焦顯微鏡可以對(duì)樣品做連續(xù)光學(xué)切片并排除非焦平面的信號(hào)干擾，為此共聚焦顯微鏡的應(yīng)用也的確更為普遍。不過(guò)市面上各種各樣的共聚焦顯微鏡越來(lái)越多，要如何進(jìn)行選擇呢？在選擇共聚焦顯微鏡時(shí)，重要的考慮因素主要有兩點(diǎn)：您想要研究的樣本類(lèi)型（如：固定的細(xì)胞還是活細(xì)胞），以及您想要進(jìn)行的檢測(cè)類(lèi)型（如：靜態(tài)還是動(dòng)態(tài)細(xì)胞過(guò)程）。

　　一、固定細(xì)胞的共聚焦成像

　　要對(duì)固定且染色了的細(xì)胞或組織成像，我們一般選擇激光掃描共聚焦（LSCM）。這主要是因?yàn)楣潭ǖ乃兰?xì)胞缺乏活細(xì)胞中的快速生物學(xué)事件，能更好的受益于LSCM較高的空間分辨率。LSCM成像是通過(guò)激光對(duì)樣品進(jìn)行光學(xué)層切，掃描速度（取決于掃描陣鏡速度）一般為1fps。曝光時(shí)間越長(zhǎng)意味著光漂白的風(fēng)險(xiǎn)越大，但對(duì)于固定的死細(xì)胞，時(shí)間并不是很關(guān)鍵，我們可以通過(guò)拍多張圖片來(lái)平均。

　　二、活細(xì)胞的共聚焦成像

　　成像活細(xì)胞需要額外的保護(hù)，以免不友好環(huán)境的干擾。在成像時(shí)，我們首先需要考慮的是保持細(xì)胞的活性和健康，尤其對(duì)于進(jìn)行time-lapse（時(shí)間序列）的研究來(lái)說(shuō)?？刂苹罴?xì)胞生理狀態(tài)的快速生化事件是大多數(shù)人zui想要研究的，但這些事件對(duì)于傳統(tǒng)LSCM來(lái)說(shuō)太快了。此外，LSCM的長(zhǎng)時(shí)間曝光還會(huì)引發(fā)毒性光照損傷細(xì)胞。因此，對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行成像會(huì)需要特殊的共聚焦顯微鏡。