激光共聚焦顯微鏡(LaserScanningConfocalMicroscope簡(jiǎn)稱LSCM)是以激光作為激發(fā)光源,采用光源針孔與檢測(cè)針孔共軛聚焦技術(shù),對(duì)樣本進(jìn)行斷層掃描,以獲得高分辨率光學(xué)切片的熒光顯微鏡系統(tǒng),并帶有一套對(duì)其所觀察到的對(duì)象進(jìn)行數(shù)字圖像分析處理的系統(tǒng)軟件。
激光共聚焦顯微鏡(LSCM)屬于細(xì)胞生物領(lǐng)域的新型儀器,在醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)研究中應(yīng)用于多重?zé)晒庥跋瘛?D立體影像重建、3D動(dòng)態(tài)影像獲取與分析、神經(jīng)立體分布影像、形態(tài)與動(dòng)態(tài)分析、次微米單晶熒光影像技術(shù)、多重?zé)晒獾鞍子跋窦夹g(shù)、熒光共振能量轉(zhuǎn)移、細(xì)胞離子流定量分析、長(zhǎng)時(shí)間影像記錄、Z軸掃描與測(cè)量、基因影像分析、染色體多重?zé)晒庠憩F(xiàn)、活體胚胎研究、穿透光影像/反射光影像、材料表面分析、材料顯微硬度分析、晶園分析及薄膜分析。簡(jiǎn)而言之,只要目的結(jié)構(gòu)是用熒光探針標(biāo)記的,都可用激光共聚焦顯微鏡觀察。
激光共聚焦顯微鏡在以下研究領(lǐng)域中應(yīng)用較為廣泛:
1、細(xì)胞生物學(xué):如:細(xì)胞結(jié)構(gòu)、細(xì)胞骨架、細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)、流動(dòng)性、受體、細(xì)胞器結(jié)構(gòu)和分布變化、細(xì)胞凋亡機(jī)制;各種細(xì)胞器、結(jié)構(gòu)性蛋白、DNA、RNA、酶和受體分子等細(xì)胞特異性結(jié)構(gòu)的含量、組分及分布進(jìn)行定量分析;DNA、RNA含量、利用特定的抗體對(duì)紫外線引起的DNA損傷進(jìn)行觀察和定量;分析正常細(xì)胞和癌細(xì)胞細(xì)胞骨架與核改變之間的關(guān)系;細(xì)胞黏附行為等
2、生物化學(xué):如:酶、核酸、受體分析、熒光原位雜交、雜色體基因定位等,利用共聚焦技術(shù)可以取代傳統(tǒng)的核酸印跡染交等技術(shù),進(jìn)行基因的表達(dá)檢測(cè),使基因的轉(zhuǎn)錄、翻譯等檢測(cè)變的更加簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確。
3、藥理學(xué):如:藥物對(duì)細(xì)胞的作用及其動(dòng)力學(xué);藥物進(jìn)入細(xì)胞的動(dòng)態(tài)過(guò)程、定位分布及定量
4、生理學(xué)、發(fā)育生物學(xué):如:膜受體、離子通道、離子含量、分布、動(dòng)態(tài);動(dòng)物發(fā)育以及胚胎的形成,骨髓干細(xì)胞的分化行為;細(xì)胞膜電位的測(cè)量.熒光漂白恢復(fù)(FRAP)、熒光漂白丟失(FLIP)的測(cè)量等。
5、遺傳學(xué)和組胚學(xué):如:細(xì)胞生長(zhǎng)、分化、成熟變化、細(xì)胞的三維結(jié)構(gòu)、染色體分析、基因表達(dá)、基因診斷。