細(xì)胞分子生物學(xué)的關(guān)鍵是制備用于生物大分子和生化學(xué)分析的細(xì)胞。在進(jìn)行復(fù)雜的分子雜交等分子生物學(xué)研究中,由于非目的細(xì)胞的污染而嚴(yán)重影響了實(shí)驗(yàn)結(jié)果。從新鮮組織獲得的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),雖可減少污染,但由于培養(yǎng)環(huán)境不同于組織自然生長狀態(tài),培養(yǎng)細(xì)胞并不能反映它們原生的基因表達(dá)方式和分子事件。激光顯微切割技術(shù)是為了從多種細(xì)胞構(gòu)成的組織中獲得純一細(xì)胞而逐漸發(fā)展起來的。它是20世紀(jì)90年代后期,由現(xiàn)代物理學(xué)和生物學(xué)相結(jié)合的精確取材技術(shù)。激光顯微切割技術(shù)(Laser Microdissection,LMD)是一項(xiàng)借助激光顯微切割儀,在顯微鏡下從組織切片或涂片中分離、純化單一類型細(xì)胞群體或單個細(xì)胞的技術(shù),具有快速、準(zhǔn)確且操作簡便的特點(diǎn),該技術(shù)成功地解決了大塊分離組織中的細(xì)胞功能異質(zhì)性問題
11月24日15:00,徠卡顯微系統(tǒng)聯(lián)合丁香園舉辦「激光顯微切割技術(shù)與組織區(qū)組學(xué)研究」線上分享,邀請到徠卡生命科學(xué)顯微鏡高級應(yīng)用專家高天龍向大家介紹這項(xiàng)技術(shù)的原理、特性和在多個領(lǐng)域的應(yīng)用情況。掃碼即可免費(fèi)預(yù)約報名!直播結(jié)束后,我們會安排發(fā)送本次直播的相關(guān)資料。
TIPS
激光顯微切割的應(yīng)用領(lǐng)域非常廣泛,主要用于醫(yī)院病理科、腫瘤研究、疾病病理研究、植物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、中藥研究、法醫(yī)鑒定等領(lǐng)域。
1、 腫瘤研究:主要通過常規(guī)染色或是熒光染色,以石蠟或冰凍切片的方式制備,通過形態(tài)學(xué)特異性的獲取腫瘤組織,制備高度單一的腫瘤樣品,后期提取DNA、RNA、蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì),分別分析如基因突變(測序)、基因的表達(dá)譜(熒光定量)蛋白標(biāo)志物(2D電泳、質(zhì)譜、蛋白測序等)。
2、 病理研究:主要通過常規(guī)染色或是熒光染色,以石蠟或冰凍切片的方式制備,通過形態(tài)學(xué)特異性的獲取特定組織或細(xì)胞,分析特定組織類型的基因表達(dá)等。如腦片的海馬與皮層研究、糖尿病的病理研究、疾病的病理研究、還有一些病理診斷等。
3、 細(xì)胞生物學(xué):特定的轉(zhuǎn)基因動物或轉(zhuǎn)基因細(xì)胞,通過熒光蛋白,特異性的識別轉(zhuǎn)基因陽性的細(xì)胞,特定獲取進(jìn)行分析。
4、 植物學(xué):利用很多植物組織有自發(fā)熒光的特性,不同的組織的自發(fā)熒光不同,分析特定組織類型的基因表達(dá)或蛋白、特定活性物質(zhì)的表達(dá)。主要應(yīng)用于植物病理以及生理病理機(jī)制方面的研究,如白云杉的防御機(jī)制研究、水稻共生菌研究、柑橘病理過程研究、植物染色體研究等等。
5、 法醫(yī)學(xué):獲取體液標(biāo)本,通過細(xì)胞涂片的方式,特異性的常規(guī)染色,特定的獲取細(xì)胞、血細(xì)胞、上皮細(xì)胞等進(jìn)行DNA指紋的比對。
6、 活細(xì)胞研究:通過特定的帶膜培養(yǎng)皿,特異性的分離單細(xì)胞或細(xì)胞克隆,獲取后的細(xì)胞可以進(jìn)行進(jìn)一步的后續(xù)培養(yǎng)或直接分析。
7、 中藥學(xué)研究:通過激光顯微切割聯(lián)合液質(zhì)聯(lián)用進(jìn)行中藥質(zhì)量的評價或特定組織生物活性物質(zhì)的評價。評價特定組織類型的基因表達(dá)。
染色體研究:利用激光顯微切割獲取單條的染色體,分析單條染色體上的基因定位或單條染色體測序等。
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