激光共聚焦顯微鏡和掃描電鏡的區(qū)別
激光共聚焦顯微鏡和掃描電鏡都是點(diǎn)源逐點(diǎn)掃描成像,通過(guò)控制掃描驅(qū)動(dòng)范圍,調(diào)節(jié)放大倍數(shù)。激光共聚焦顯微鏡是通過(guò)激光掃描的方式工作,可以獲得三維圖像。掃描電鏡是利用細(xì)聚焦電子束在樣品表面掃描時(shí)激發(fā)出來(lái)的各種物理信號(hào)來(lái)調(diào)制成像的,只能得到二維圖像,不能得到三維圖像。
1、極限分辨率不同(放大信號(hào)源不同)
激光共聚焦:極限分辨率 150nm
掃描電鏡:20nm~0.8nm
2、掃描驅(qū)動(dòng)方式不同
激光共聚焦:激光轉(zhuǎn)鏡控制激光掃描范圍和掃描速度
掃描電鏡:電磁線圈控制電子束掃描范圍和掃描速度
3、立體成像不同
激光共聚焦:通過(guò)納米精度步進(jìn)電機(jī)驅(qū)動(dòng)樣品在Z軸方向逐層成像,軟件將設(shè)定的各層圖像合成清晰三維立體圖像
掃描電鏡: 單幀圖像具有很大景深,屬于二維圖像
4、應(yīng)用范圍不同
激光共聚焦:幾倍~ 幾千倍
掃描電鏡 :幾倍~幾十萬(wàn)倍
5、工作環(huán)境不同
激光共聚焦:可在大氣環(huán)境中測(cè)試樣品
掃描電鏡:在高真空環(huán)境下測(cè)試樣品
激光共聚焦顯微鏡 的優(yōu)點(diǎn)
激光共聚焦顯微鏡 匯集了激光技術(shù)、顯微鏡技術(shù)、免疫熒光技術(shù)、計(jì)算機(jī)及圖像處理技術(shù)、精密的機(jī)械技術(shù)等,高、精、尖細(xì)胞分析及工程技術(shù)于一體的新技術(shù)。使其成為形態(tài)學(xué)、分子細(xì)胞生物學(xué)、神經(jīng)科學(xué)、藥理學(xué)、遺傳學(xué)等領(lǐng)域中新一代強(qiáng)有力的研究工具。
激光共聚焦顯微鏡 是現(xiàn)今較為先進(jìn)的光學(xué)顯微鏡,其主要優(yōu)點(diǎn)為:
1、以激光為光源,在相應(yīng)的熒光探針標(biāo)記后,對(duì)樣本進(jìn)行逐點(diǎn)掃描,逐層獲得二維光學(xué)橫斷面圖像,具有“細(xì)胞CT”的功能,并可通過(guò)計(jì)算機(jī)三維重建軟件支持,獲得三維圖像,并可以任意角度旋轉(zhuǎn),觀察細(xì)胞,組織立體形態(tài)和空間關(guān)系;
2、可以對(duì)活細(xì)胞和組織進(jìn)行無(wú)損傷的觀察,動(dòng)態(tài)測(cè)量細(xì)胞內(nèi)的Ca離子濃度和pH值等活細(xì)胞生理信息;
3、可對(duì)細(xì)胞膜的流動(dòng)性,細(xì)胞間通訊,細(xì)胞融合,細(xì)胞骨架彈性測(cè)量等,可用作“光刀子”完成細(xì)胞內(nèi)“外科手術(shù)”。這一技術(shù)可以對(duì)活細(xì)胞和組織進(jìn)行原位動(dòng)態(tài)定量的觀察和測(cè)量。