激光共聚焦顯微鏡在生物學(xué)上的應(yīng)用
1.適用于細(xì)胞生物學(xué)、細(xì)胞生理學(xué)、神經(jīng)生物學(xué)和神經(jīng)生理學(xué)等幾乎所有涉及細(xì)胞研究領(lǐng)域。
2.對活細(xì)胞進(jìn)行無損傷性的實(shí)時觀察分析,進(jìn)行形態(tài)和功能相結(jié)合的研究。對細(xì)胞檢測無損傷、、可靠和優(yōu)良重復(fù)性;數(shù)據(jù)圖象可及時輸出或長期儲存。
3.對活細(xì)胞和組織或細(xì)胞組織切片進(jìn)行連續(xù)斷層掃描,能獲得精細(xì)的單個細(xì)胞或一群細(xì)胞或所觀察的局部組織的各個層面結(jié)構(gòu)(二維和三維)(包括細(xì)胞特異結(jié)構(gòu)-如細(xì)胞骨架、染色體、細(xì)胞器和細(xì)胞膜系統(tǒng),樣品的深層結(jié)構(gòu))和完整的三維圖像(如分析隨時間變化,即四維圖象,也可進(jìn)行隨熒光波長變化的圖象,即可達(dá)到更多維的圖象)。定位組織細(xì)胞及其他所需要觀察的對象結(jié)構(gòu)的空間位置,進(jìn)行實(shí)時動態(tài)的觀察、分析和記錄;分析的定性、定量、定時和定位分布。
4.熒光標(biāo)記探針標(biāo)記的活細(xì)胞或切片標(biāo)本的細(xì)胞生物物質(zhì),膜標(biāo)記、細(xì)胞示蹤、免疫物質(zhì)、免疫反應(yīng)、受體或配體,核酸等觀察;可以在同一張樣品上進(jìn)行同時多重物質(zhì)標(biāo)記,同時觀察。
5.細(xì)胞內(nèi)離子熒光標(biāo)記,單標(biāo)記或多重標(biāo)記,檢測細(xì)胞內(nèi)如pH和鈉、鉀、鈣、鎂等離子濃度的比率測定及其動態(tài)變化;
6.細(xì)胞膜電位測量,自由基的檢測等;
7.進(jìn)行定位的熒光漂白恢復(fù)實(shí)驗(yàn),結(jié)合熒光漂白中熒光丟失實(shí)驗(yàn),研究細(xì)胞間通訊和其他有關(guān)細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)(分子等)的運(yùn)動;在時間掃描實(shí)驗(yàn)和光漂白(光淬滅)實(shí)驗(yàn)中,可同時對每個通道的數(shù)據(jù)和圖象進(jìn)行同時輸出和轉(zhuǎn)換。進(jìn)行熒光共振能量轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn),通過熒光波長的變化,研究細(xì)胞內(nèi)分子、離子的運(yùn)動,相互作用。
8.有非常(空間定位、定量、定波長、定時間)、靈敏、快速和能在同一時間內(nèi)完成對細(xì)胞組織多重?zé)晒鈽?biāo)記(即使是發(fā)射波長非常接近,比如相差只有數(shù)nm的多重?zé)晒?的各種波長圖象的分離和觀察分析,以及多重?zé)晒鈽?biāo)記共定位等的在線測量分析功能
激光共聚焦顯微鏡在生物領(lǐng)域的*性
與傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡相比, 激光共聚焦顯微鏡 具有更高的分辨率,實(shí)現(xiàn)多重?zé)晒獾耐瑫r可觀察并可形成清晰的三維圖像等優(yōu)點(diǎn),在對生物樣品的觀察中, 激光共聚焦顯微鏡 有如下*性:
1、對活細(xì)胞組織或細(xì)胞切片進(jìn)行連續(xù)掃描,可獲得精細(xì)的細(xì)胞骨架、染色體、細(xì)胞器和細(xì)胞膜系統(tǒng)的三維圖像。
2、可以得到比普通熒光顯微鏡更高對比度、高解析度圖像,同時具有高靈敏度,杰出樣品的保護(hù)。
3、多維圖像的獲得。如7維圖像(XYZaλIt):xyt 、xzt 和xt掃描,時間序列掃描、旋轉(zhuǎn)掃描、區(qū)域掃描、光譜掃描,同時方便進(jìn)行圖像處理。
4、細(xì)胞內(nèi)離子熒光標(biāo)記。單標(biāo)記或多標(biāo)記,檢測細(xì)胞內(nèi)如PH和鈉、鈣、鎂等離子濃度的比率測定及動態(tài)變化。
5、熒光標(biāo)記。探頭標(biāo)記的活細(xì)胞或切片標(biāo)本的活細(xì)胞生物物質(zhì),膜標(biāo)記、免疫物質(zhì)、免疫反應(yīng)、受體或配體、核酸等觀察;可以在同一張樣品上同時進(jìn)行多重物質(zhì)標(biāo)記,同時觀察。
6、對細(xì)胞檢測無損傷、、可靠和優(yōu)良重復(fù)性;數(shù)據(jù)圖像可及時輸出或長期儲存。